Problem
建议您优化载体与插入片段比例，使用高效连接酶，确保DNA末端完整。
首先，您的所有操作均应在无菌条件和冰上进行，以防止细胞污染和损伤。热激的温度和时间需要严格控制，一般情况下，42 ℃热激60秒是较为常用的条件。SOC培养基比LB培养基的转化效率高2倍，因此推荐您使用SOC培养基进行操作。最后，建议平板放置与培养箱预热半小时，利于涂布，并能快速长出菌落。
